貨號
產(chǎn)品規(guī)格
售價
備注
BN20390-500T
500T
￥350.00
產(chǎn)品描述
規(guī)格：500T/1000T
保存：MTT 溶液-20℃保存；Formazan 溶解液室溫或-20℃保存。
產(chǎn)品內(nèi)容：
產(chǎn)品簡介：
MTT 可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成結(jié)晶狀的深紫色產(chǎn)物 formazan，在特定溶劑存在的 情況下，可以被完全溶解，然后通過酶標儀可以測定 490nm 波長附近的吸光度。細胞增殖越多越快， 則吸光度越高；細胞毒性越大，則吸光度越低。
使用說明：
1.收集對數(shù)期細胞，調(diào)整細胞懸液濃度，分于 96 孔板，每孔 180μL，3000-10000 個細胞/孔。
2.置 37℃、5%CO2 溫箱培養(yǎng)使細胞貼壁，培養(yǎng) 6-24 小時。
3.加入適當濃度的受試化合物，繼續(xù)培養(yǎng)適當時間。
4.小心吸去上清，加入 90μL 新鮮培養(yǎng)液，再加入 10μL MTT 溶液，繼續(xù)培養(yǎng) 4 h。
5.然后吸掉上清，每孔加入 110μL Formazan 溶解液，置搖床上低速振蕩 10 min，使結(jié)晶物充分溶解。在酶聯(lián)免疫檢測儀 490 nm 處測量各孔的吸光值。
6.同時設(shè)置調(diào)零孔（培養(yǎng)基、MTT、 Formazan 溶解液），對照孔（細胞、相同濃度的藥物溶解 介質(zhì)、培養(yǎng)液、MTT、 Formazan 溶解液），每組設(shè)定 3 復孔。
注意事項：
1.由于使用 96 孔板進行檢測，如果細胞培養(yǎng)時間較長，一定要注意蒸發(fā)的問題。一方面，由于 96 孔板周圍一圈最容易蒸發(fā)，可以采取棄用周圍一圈的辦法，改加 PBS，水或培養(yǎng)液；另一方面，可以把 96 孔板置于靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的地方，以緩解蒸發(fā)。
2.MTT 溶液為黃色需避光保存，長時間光照會導致失效。當顏色變?yōu)榛揖G色時，請勿使用。 Formazan 溶解液結(jié)凍或產(chǎn)生沉淀時可以 37℃水浴孵育以促進溶解，并且必須在全部溶解并混勻后使用。
3.為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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