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應(yīng)用范圍：細(xì)胞成像、細(xì)胞增殖和功能、細(xì)胞示蹤、細(xì)胞計(jì)數(shù)

產(chǎn)品參數(shù) 

外觀：可溶于 DMSO 的白色或淺黃色固體 

CAS 號(hào)：150347-59-4 

Ex/Em: 494/521 nm（pH=7） 

分子式：C29H19NO11 

分子量：557.47 

細(xì)胞標(biāo)記機(jī)制：

貯存條件 -20℃ 避光保存，保質(zhì)期 12 個(gè)月。

產(chǎn)品介紹 

5(6)-CFDA, SE 是一種可對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的細(xì)胞示蹤染料，不僅可用于細(xì)胞增殖的體外實(shí)驗(yàn)，還可用于追蹤細(xì)胞在體內(nèi)的分裂增殖過(guò)程。

5(6)-CFDA, SE 是二乙酸熒光素（Fluorescein diacetate， FDA）的衍生物，具有細(xì)胞膜滲透性，本身不具有熒光發(fā)光性。當(dāng)通過(guò)被動(dòng)運(yùn)輸穿透細(xì)胞膜進(jìn)入活細(xì)胞后，可被胞漿內(nèi)的酯酶催化生成羧基熒光素琥珀酰亞胺酯（carboxyfluorescein succinimidyl ester，CFSE），可發(fā)強(qiáng)烈的綠色熒光，不能穿透細(xì)胞膜，能完好的保留在胞內(nèi)。CFSE 還可自發(fā)并不可逆地與細(xì)胞內(nèi)的氨基結(jié)合從而偶聯(lián)到細(xì)胞蛋白質(zhì)上，同時(shí)過(guò)量且未被偶聯(lián)的 5(6)-CFDA, SE 通過(guò)被動(dòng)擴(kuò)散回到細(xì)胞外培養(yǎng)基內(nèi)，被后續(xù)清洗步驟所清除。經(jīng) 5(6)-CFDA, SE 標(biāo)記的非分裂細(xì)胞的熒光非常穩(wěn)定，穩(wěn)定標(biāo)記的時(shí)間可達(dá)數(shù)月，因此非常適用于細(xì)胞群落分析。

5(6)-CFDA, SE 標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均一，優(yōu)于以前使 用的其他細(xì)胞示蹤熒光探針如 PKH26，并且分裂后的子代細(xì)胞的熒光分配也很均一。在細(xì)胞分裂增殖過(guò)程中，CFSE 標(biāo)記熒光可平均分配至兩個(gè)子代細(xì)胞中，熒光強(qiáng)度變?yōu)橛H代 細(xì)胞的一半，通過(guò)流式細(xì)胞儀（FL1 通道）根據(jù)熒光強(qiáng)度的不同，可檢測(cè)出未分裂細(xì)胞，分裂一次（1/2 的熒光強(qiáng)度），二次（1/4 的熒光強(qiáng)度），三次（1/8 的熒光強(qiáng)度），以及更多分裂次數(shù)的細(xì)胞。5(6)-CFDA, SE 可檢測(cè)分裂次數(shù)多達(dá)八次 甚至更多。經(jīng) 5(6)-CFDA, SE 標(biāo)記的細(xì)胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究，且具有不會(huì)使鄰近細(xì)胞染色的功能。5(6)-CFDA, SE 最常用于淋巴細(xì)胞的增殖檢測(cè)，也可用于成纖維細(xì)胞，自然殺傷細(xì)胞，造血祖細(xì)胞等其他細(xì)胞的增殖檢測(cè)。

5(6)-CFDA, SE 標(biāo)記細(xì)胞呈綠色熒光，除了流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞增殖外，還可用熒光酶標(biāo)板定量活細(xì)胞數(shù)目，或者用熒光顯微鏡進(jìn)行均一染色的細(xì)胞示蹤觀察。

注意事項(xiàng) 

1. 5(6)-CFDA, SE 與胺基反應(yīng)，所以實(shí)驗(yàn)過(guò)程中不可使用含胺的緩沖液。 

2. 熒光染料均存在淬滅問(wèn)題，請(qǐng)盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。 

3. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。